細(xì)胞遷移/侵襲實(shí)驗(yàn)
更新：2015-10-5 22:36:40 點(diǎn)擊：
介紹
細(xì)胞遷移/侵襲實(shí)驗(yàn)
Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)就是用一層膜將高營養(yǎng)的培養(yǎng)液和低營養(yǎng)的培養(yǎng)液隔開，細(xì)胞放在低營養(yǎng)的培養(yǎng)液里，細(xì)胞會往高營養(yǎng)的培養(yǎng)液方向移動。應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究。
（1）共培養(yǎng)體系：
小于3.0um孔徑條件下，細(xì)胞不會遷徙通過，因此，若研究不涉及細(xì)胞運(yùn)動能力，不需要細(xì)胞穿過聚碳酸酯膜，則應(yīng)選擇3.0μm以下孔徑。常用0.4、3.0μm。我們實(shí)驗(yàn)室用的是0.4μm。將細(xì)胞A種于上室，細(xì)胞B種于下室，可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的影響。
（2）趨化性實(shí)驗(yàn)
可用5.0、8.0、12.0μm膜，上室細(xì)胞可穿過聚碳酸酯膜進(jìn)入下室，計(jì)數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量可反映下室成分對上室細(xì)胞的趨化能力。
①細(xì)胞B對細(xì)胞A的趨化作用：將細(xì)胞A種于上室，細(xì)胞B種于下室，可以研究細(xì)胞B分泌或代謝產(chǎn)生的物質(zhì)對細(xì)胞A的趨化作用。
②趨化因子對細(xì)胞的趨化作用：將細(xì)胞種于上室，下室加入某種趨化因子，可研究該趨化因子對細(xì)胞的趨化作用。
（3）腫瘤細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)
常用8.0、12.0μm膜，上室種腫瘤細(xì)胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，腫瘤細(xì)胞會向營養(yǎng)成分高的下室跑，計(jì)數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量可反映腫瘤細(xì)胞的遷移能力。
（4）腫瘤細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)常用8.0、12.0μm膜，原理與腫瘤細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)類似。在聚碳酸酯膜上涂上一層基質(zhì)膠，模仿細(xì)胞外基質(zhì)，上室種腫瘤細(xì)胞，下室加入FBS或?qū)嶒?yàn)設(shè)定的藥物或者影響因子，細(xì)胞會分泌相關(guān)酶類消化模擬細(xì)胞外基質(zhì)膜的基質(zhì)膠，從而從上室遷移到下室，通過計(jì)數(shù)進(jìn)入下室的細(xì)胞量測定細(xì)胞的侵襲能力。
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