介紹
逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)
逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng) (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)可以:(1)分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物;(2)獲取目的基因;(3)合成cDNA探針;(4)構(gòu)建RNA高效轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。
miR-23a擴增曲線
miR-23a熔解曲線
服務(wù)內(nèi)容
Real-time qPCR就是在PCR擴增過程中,通過熒光信號,對PCR進程進行實時檢測。由于在PCR擴增的指數(shù)時期,模板的Ct值和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系,所以成為定量的依據(jù)。由于Real-time qPCR的眾多優(yōu)點,現(xiàn)在已經(jīng)是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項重要技術(shù),并成為基因表達差異和文章發(fā)表不可或缺的部分。real-time qPCR輸出的數(shù)據(jù)不同于常規(guī)PCR電泳檢測,很多沒有做過real-time qPCR的研究者常常感到高深莫測,不知從何入手;甚至一些做過一些實驗的研究者也會對數(shù)據(jù)處理分析感到迷惑。很多時候,盡管知曉qPCR的原理和基本操作,仍然浪費時間和精力,而得不到好的結(jié)果或?qū)Υ罅康臄?shù)據(jù)不知所措。 江陰雨汐生物的real-time qPCR技術(shù)服務(wù),根據(jù)實驗?zāi)康模O(shè)計實驗方案(相對定量或絕對定量;SYBR Green I或Taqman探針方法),用完全按照符合國際標(biāo)準(zhǔn)(MIQE)的real-time qPCR試劑完成實驗,提供符合文章發(fā)表的客觀事實實驗報告和原始數(shù)據(jù)。 服務(wù)說明 1需提供新鮮或保存完好的細(xì)胞(至少5×10^6)、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料; 2或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好)或總DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之間,完整性好); 3或反轉(zhuǎn)錄好的cDNA不少于30μl(反轉(zhuǎn)錄的總RNA完整性好,純度在1.9-2.1之間); 4 同時提供待測基因序列或登錄號。 報告內(nèi)容 總RNA(或DNA)濃度,電泳圖片,擴增曲線,熔解曲線,Ct值以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析(可選) |
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